產(chǎn)品概述：
儲(chǔ)存條件
Buffer R-I:細(xì)胞裂解液。室溫密閉貯存。
Buffer R-II:中和液。室溫密閉貯存。
Buffer W1 A concentrate:洗滌液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）?；旌暇鶆?，室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate:去鹽液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）?；旌暇鶆?，室溫密閉貯存。
Buffer TE(DNase & RNase-free):洗脫液。10 mM Tris-HCI, 0.1 mM EDTA, pH 7.5。室溫密閉貯存。



流程圖

說明書：

 UE-UE-MN-MS-RNA-10/UE-MN-MS-RNA-50/UE-MN-MS-RNA-250    

常見問題解答：

◆RNA提取得率低
·該組織或者細(xì)胞中RNA含量偏低
不同細(xì)胞和組織中RNA的豐度不同，如肝臟，胰腺，心臟等是高豐度組織(總RNA含量2-4 μg/mg)，腦，胚胎，腎臟，肺，胸腺，卵巢等是中豐度組織(總RNA含量0.05-2 μg/mg)，膀胱，骨，脂肪等是低豐度組織(總RNA含量<0.05 μg/mg)。
·組織起始量太少或者太多
樣品量過少，則細(xì)胞組織中RNA含量較低；樣品量過多則可能超過裂解液的裂解能力，裂解將不完全，從而導(dǎo)致RNA得率低。
·取樣為上清液時(shí)，盡量吸盡上清（如細(xì)胞培養(yǎng)上清）。
·洗脫液溫度過低
可以將洗脫液在65℃預(yù)熱后使用。

◆OD260/OD280比值偏低
·蛋白質(zhì)污染
在加入R-II中和離心后避免將沉淀物轉(zhuǎn)移到RNA結(jié)合膜上。
·用水稀釋樣品
RNA應(yīng)使用TE Buffer稀釋后再進(jìn)行吸光度值的測(cè)定，低離子強(qiáng)度或低pH值溶液會(huì)使OD280值升高。
·多糖或多酚的殘留
一些特殊的組織和植物中，多糖、多酚含量較多，這些殘留也會(huì)導(dǎo)
致OD260/OD280比值偏低。因此，從這類材料中提取RNA時(shí)，需要注意多糖、多酚雜質(zhì)的去除。
·確定Buffer W1A和Buffer W2中加入的乙醇是否是100%無水乙醇/95%乙醇，加入體積是否正確。

◆RNA降解
·材料保存不當(dāng)
使用的組織材料不夠新鮮。提取RNA的組織材料應(yīng)采用新鮮的組織材料，或?qū)⑿迈r的組織材料用液氮迅速冷凍后置于-80℃保存。絕不能未經(jīng)液氮速凍而直接保存于-80℃冰箱中。
·裂解液用量不足
如果試劑沒有問題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養(yǎng)皿中裂解樣品，一定要使裂解液完全浸沒樣品。
·特殊材料
某些富含內(nèi)源核酸酶的樣品(如肝臟，胸腺等)，即使使用電動(dòng)勻漿器勻漿也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮條件下將組織研碎，并且勻漿時(shí)使用更多裂解液。
·外源RNA酶的污染
試劑，器械及實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的RNA酶進(jìn)入實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。
·內(nèi)源RNA酶的污染
實(shí)驗(yàn)樣品過多；勻漿時(shí)溫度過高。

◆基因組DNA污染
·樣品用量過多
樣品用量超出了裂解液Buffer R-I的處理范圍。請(qǐng)選擇合適的樣本處理量。
·樣品中含有有機(jī)溶劑（如乙醇、DMSO等）
避免這些會(huì)引起裂解液性質(zhì)改變的物質(zhì)。
·加入Buffer R-II離心后，取上清時(shí)避免吸入沉淀。